ELISAテストは多くの病気を検出するので、それはそれが医学などに広く応用されている理由です。しかし、ELISAテストはライム病の診断で最もよく知られています。 ELISAテストとは何ですか？結果を解釈する方法は？テストの価格はいくらですか？
目次：
- ELISAテスト-それは何を検出しますか？ ELISAテストの応用
- ELISAテスト-テストとは何ですか？
- ELISAテストとライム病-いつ実行するのですか？
- ELISAテスト-価格。 ELISAテストの費用はいくらですか？
- ELISAテスト-結果。それらは誤検知になりますか？
- ELISAテスト-結果。彼らは偽陰性になることができますか？
ELISAテスト、すなわち酵素結合免疫吸着アッセイは、特に、血液中の抗体の定量的検出のため。
このため、ライムボレリア症などの細菌性疾患の診断にはELISAテストが使用されています。
ELISA法の利点は、その単純さと迅速な実装、および高感度の可能性です。 ELISA法は、ボレリアタンパク質（抗原）と患者のサンプル中の抗体を検出するために設計された特定のモノクローナル抗体で満たされたウェルを備えた特別なプラスチックプレートを使用して実行されます。
ELISAテスト-それは何を検出しますか？ ELISAテストの応用
ELISA法は高感度で簡便なため、多くの疾患の診断に応用できますが、ライム病の診断法として最もよく知られています。
ライムボレリア症の診断の場合、いわゆる間接ELISAを使用すると、テストした材料から特定のIgMまたはIgGを検出できます。同様に、診断のために抗体を検出できます。
- ウイルス感染症：ヘルペスウイルス（ヘルペス、帯状疱疹、エプスタインバー、サイトメガロウイルス）、HIV、肝炎ウイルス（HBVおよびHCV）
- 原虫感染：トキソプラズマ症、ジアルジア症
- 自己免疫疾患：セリアック病（抗tTGまたは抗DPG抗体）、橋本病（抗TGおよび抗TPO抗体）、炎症性腸疾患（抗ASCAおよび抗ANCA抗体）
- 特定のIgE抗体が検出される寄生虫症とアレルギー。それらの増加したレベルは、花粉や食物などのアレルギー、または寄生虫の侵入（武装した条虫、人間の回虫）の存在を示している可能性があります
ELISA法（いわゆるサンドイッチELISA）には、抗体以外のタンパク質のサンプルの検出を可能にする変更もあります。次に、テストの目的は、生体物質を検出することです。
- ウイルスまたはバクテリアの断片、ほとんどの場合、それらは特定の病原体に特徴的な抗原です
- エストロゲン、プロラクチン、TSH、fT4、コルチゾールなどの血清ホルモン
- 酵素、例えばカルプロテクチン、膵臓エラスターゼ、アルカリホスファターゼ
- 腫瘍マーカー、例えばCA-125
- 血清中の薬物の存在
この方法は食品業界にも適用でき、食品中の微量のアレルゲン（牛乳、ピーナッツなど）、GMO、毒素を検出できます。
ELISAテスト-それは何ですか？
たとえば、ELISA法を使用したライムボレリア症の診断は、生体物質中の免疫タンパク質、つまりボレリア抗原に対する反応中に生じる抗体の検出にあります。
抗体は、IgMとIgGの2つのクラスでテストされます。 IgMは、細菌と接触したときに体内に現れる最初の抗体であり、時間の経過とともに減少します。
それらの場所は、数十年間体内に留まることができるより永続的なIgG抗体によって占められています。
このようにして、ボレリアスピロヘータに特異的に向けられた抗体を検出することにより、体内の細菌の存在を間接的にテストします。
感染のさまざまな段階にある抗体は、さまざまなボレリアタンパク質に向けられる可能性があります。たとえば、初期の段階ではp41タンパク質です。
後の段階では、p21、p30、p39、p43など、より多くのタンパク質が出現し始めます。これがライム病の診断が非常に難しい理由です。
細菌タンパク質の選択は、検査が高い診断価値を持つために非常に重要です。したがって、日常的にライム病の診断では、II世代またはIII世代のELISAテストを使用する必要があります。このテストでは、最も信頼できる結果を得るためにタンパク質のセットが選択されます。
ELISAテストとライム病。いつすべきか
ライムボレリア症は、ボレリアバーグドルフェリ菌とその多くの品種によって引き起こされる細菌性疾患です。
ボレリアに対する免疫反応の複雑さと実験室の方法の不完全さのため、病気の診断は単純ではありません。
最も一般的に使用されている実験室メソッドは、細菌タンパク質に対して生じた特定の抗体を検出する高感度ELISAメソッドです。
ライムボレリア症の診断では、以下の段階が区別される間接ELISA法が使用されます：
- 患者から収集された物質、例えば血清とプレート上のウェルのインキュベーション。テストされた材料にボレリアに対する抗体がある場合、それらは反応ウェルの底でタンパク質に結合します
- 次に、余分な血清を特別な洗浄液（バッファー）で洗い流し、いわゆるコンジュゲート、すなわち、反応ウェル内の以前にリンクされた抗体に結合する酵素にリンクされた抗体
- 次に、コンジュゲートの基質が追加され、呈色反応が起こる（陽性結果）または呈色反応が起こらない（陰性結果）
- 最後のステップは、患者の血清中のボレリアに対する抗体の濃度のリーダー（分光光度計）による読み取りです
ライム病のELISA法は血液から行われ、神経学的症状（神経ボレリア症）の場合は脳脊髄液からも行われます。
偽陽性の結果が出る可能性が高いため、滑液の検査は行わないでください。
病気の診断の基礎は、臨床検査の結果によって確認された、それを示す臨床症状です。
ボレリアに対する抗体が健康な人でも検出されることが示されているので、症状のない臨床検査結果を追加してもライム病の診断は許可されません。
ライムボレリア症の血清学的診断は、半定量的スクリーニングELISAテストから始まります。結果が陰性の場合は、ボレリアのスピロヘータが検出されていないか、結果が偽陰性であることを意味します。
結果が陽性または弱陽性（はっきりしない）の場合、高い特異性を特徴とする確認ウエスタンブロット試験を実施する必要があります。
これは、ELISA法で得られた結果の「真実性」を確認するためです。診断中は、上記の手順をスキップすることはできません。たとえば、ウエスタンブロット法を使用してすぐに診断を行ったり、ELISAの陽性結果のみに基づいて診断を行ったりすることはできません。
ポーランドでは、非常に頻繁にライム病の診断が最初のスクリーニング段階で終了し、陽性または弱い陽性の結果の誤解を引き起こします。
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テストの費用はPLN 60程度で、すぐに実施されます。ただし、紹介の結果が出るまで約3か月待つことができます。
ELISAテスト-結果。それらは誤検知になりますか？
偽陽性の結果は、IgM抗体と他のタンパク質との交差反応に起因します。身体が産生する抗体は、他の微生物の抗原をボレリア抗原として「誤って」認識する可能性があります。
最も一般的な「間違い」は、淡蒼球、ヘルペスウイルスに感染した人、および全身性エリテマトーデスやその他のリウマチ性疾患の人に発生します。
ELISAテスト-結果。彼らは偽陰性になることができますか？
偽陰性の結果が感染の初期段階に現れる場合があります。その後、テストは約3〜4週間後に繰り返す必要があります。これは血清学的ウィンドウは、身体がまだ特定の抗体を産生するように「管理」されていない感染の初期期間です。
同じことは、十分な抗体を産生しない免疫不全の人々にも当てはまります。
特に非常に激しい感染症での大きな問題は、いわゆるボレリア抗原とそれらに特異的な抗体からなる免疫複合体。
結果として、ELISAなどの一般的に使用される方法では抗体が「見えなくなり」、抗体がテスト対象の材料に存在しても検出できません。
そのような場合、研究所は免疫複合体の分解を使用することがあります。この治療は、抗体を放出するように設計されています。しかし、研究室では標準化されていないため、この方法は広く使用されていません。
知る価値があるライム病の診断が難しいのはなぜですか？
これは、ボレリアに対する免疫反応の複雑さと実験室の方法の制限のためです。品種の多様性と、特にヨーロッパ大陸で感染を引き起こす新しい品種の出現は、効果的な診断方法の開発を促進しません。
最近では、Borrelia bissetii、Borrelia valaisiana、Borrelia spielmaniiなど、より多くの品種がヨーロッパで登場しています。さらに、ボレリアスピロヘータは、体内で嚢胞に変わったり、免疫系の細胞がアクセスできない体の場所にとどまったりします。
したがって、免疫システムから「見えない」こと。さらに、組織には炎症誘発性の強い細菌の断片が含まれている可能性があることが示されています。彼らは、臨床検査結果が陰性であるにもかかわらず、ライム病の慢性症状の原因であると考えられています。
文献
1. Witecka-Knysz E. et al。ライム病：なぜ診断がそれほど難しいのですか？検査診断士2007年4月。
2. Moore A. et al。現在のガイドライン、一般的な臨床の落とし穴、およびライム病の検査室診断のための将来の方向性、米国。 Emerg Infect Dis。 2016年7月22日（7）。
3.ダニ媒介性疾患の検査診断ワーキンググループの推奨事項：国立検査診断院、国立衛生研究所、国立衛生研究所、感染症分野の国立コンサルタント、感染症および神経感染学部、ビアウィストク医科大学、ポーランドウイルス学会、ワルシャワ2014
4. Hosseini S. et al .: Enzyme-linked Immunosorbent Assay（ELISA）From A to Z. Springer 2017。
